استفاده از تفنگ ژن در توسعه میوه

گیلاس میوه است که نسبتا وابسته به آب و هوا است. در طول رشد میوه، بلوغ آن با اسید واکنش (ABA) تنظیم می شود.

در این مطالعه، برای شناسایی چهار نوع cDNA که 8'-هیدروکسیلاز (یک آنزیم کلیدی برای کاتابولیسم اکسیداتیو ABA) را در میوه های گیلاس شیرین تشخیص می دهند، از یک روش خاموش شدن ژن ناشی از ویروس (VIGS) و روش بمباران ذرات استفاده شده است. اسید Deoxyribonucleic) Paccyp707a1-a4

Paccyp707a2 منفی تنظیم میوه گیری گیلاس گیلاس، و paccyp707a1 تحمل تحمل خشکی

ویروس ژن خاموش کننده ژن (VIGS) اشاره به ویروس آلوده گیاه حاوی یک قطعه ژن هدف می شود که می تواند باعث خاموش کردن ژن درونی شود، باعث تغییرات فنوتیپیک و سپس بررسی عملکرد ژن هدف بر اساس تنوع فنوتیپی.

شکل 1 تغییرات در بیوسنتز ABA (pacnced1)، catabolism ABA (paccyp707as) و ژن های مربوط به محتوای ABA در طی رشد و بلوغ میوه گیلاس شیرین است. (a) سطوح مطلق رونویسی چهار pacyp707as در طول رشد میوه. (b) سطوح رونویسی نسبی که در طول توسعه توسط pcnced1 و aba انباشته شده است. Actin به عنوان یک کنترل داخلی استفاده شد و بیان آن با qrt-pcr تشخیص داده شد.

بیان ژن pAccyp707a در واکنش کم آبی

ميوه هاي جمع آوري شده از 32 روز به دو گروه تقسيم شدند و ميزان ريزش آب در شرايط رطوبت نسبي 45 درصد و رطوبت نسبي بالا 100 درصد بود. محتوای ABA و سطح رونویسی pNCED1 در میوه ها به طور معنی داری بیشتر از گروه کنترل بود. او کنترل می کند (شکل 2). در مقابل بیان Paccyp707a1 پس از کمبود آب به طور قابل توجهی کاهش یافته بود و بیان Paccyp707a3 نیز کاهش یافته بود، البته به میزان کم، و بیان Paccyp707a4 و Paccyp707a2 توسط آب کم آب تحت تاثیر قرار نگرفت (شکل 2). مهم ترین تغییر در بیان paccyp707a1، که ممکن است یکی از اعضای اصلی خانواده ژن paccyp707a در خلال رسیدن میوه باشد، می باشد.

خاموش کردن ژن Paccyp707A2 موجب رنگ آمیزی و بلوغ میوه می شود

فنوتیپ میوه با Paccyp707A1 / 2-RNAi درمان می شود. در روز 28 روز پس از گلدهی، 90 میوه از سه گیلاس گیلاس کاشته شده در باغ های جداگانه انتخاب شده و به سه گروه 30 نفره برای آزمایش های خاموش شدن ژن ناشی از ویروس تقسیم شدند.

Paccyp707a1-rnai، paccyp707a2-rnai و بردار TRV (بدون ژن cyp707a) به ترتیب به ساقه میوه های گروه 1، 2 و 3 تزریق می شوند.

این میوه 7 روز پس از تلقیح ارزيابي شد.

(a) درمان میوه (d) 28 روز پس از گلدهی؛

(ب) 43d برای درمان میوه؛

(ج) 43d ترافیک بردار درمان میوه (بدون ژن cyp707a)؛

(d) 43 d از pacyp707a1 RNAi میوه درمان؛

(E) paccyp707a2 RNAi درمان میوه؛

(f) Paccyp707a2 RNAi درمان میوه 6 روز پس از درمان (کنترل حق)؛

(g) paccyp707a1 RNAi 6 روز پس از درمان میوه (کنترل میوه در سمت راست).